Keywords：食蟹猴IgG；食蟹猴血清；去除IgG食蟹猴血清；純化食蟹猴IgG；親和層析法；Cynomolgus IgG；Cynomolgus serum；IgG-depleted Cynomolgus Serum；Purified Cynomolgus IgG;

在生物醫(yī)藥研發(fā)、基因治療及非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型研究中，食蟹猴因其生理特征與人類高度相似，成為核心實(shí)驗(yàn)對(duì)象之一。而食蟹猴血清中的IgG（免疫球蛋白G），既是影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性的關(guān)鍵干擾因子，也是諸多研究（如抗體藥物開(kāi)發(fā)、血清學(xué)診斷）的核心目標(biāo)物質(zhì)。因此，精準(zhǔn)去除食蟹猴血清IgG（IgG-depleted Cynomolgus Serum）及擁有高效純化食蟹猴IgG（Purified Cynomolgus IgG），成為相關(guān)科研工作的基礎(chǔ)核心環(huán)節(jié)。IPHASE作為體外研究生物試劑引-領(lǐng)者，利用親和層析法原理，成功研發(fā)、生產(chǎn)了去除IgG食蟹猴血清（IgG-depleted Cynomolgus Serum）和純化食蟹猴IgG（Purified Cynomolgus IgG）兩款產(chǎn)品，實(shí)現(xiàn)對(duì)食蟹猴IgG的精準(zhǔn)調(diào)控，可適配不同科研場(chǎng)景的高需求。

圖片來(lái)源：參考文獻(xiàn)【1】

01    去除IgG食蟹猴血清和純化食蟹猴IgG的重要性

在利用食蟹猴進(jìn)行生物藥（尤其是治療性抗體、融合蛋白等）的臨床前研究中，研究人員面臨一個(gè)根本性矛盾：需要在其復(fù)雜的血清基質(zhì)中，高靈敏度、高特異性地檢測(cè)外源性的目標(biāo)分子。

食蟹猴血清中含有高濃度的內(nèi)源性免疫球蛋白G，其濃度通常在 5-15 mg/mL 范圍。當(dāng)引入外源性治療性單抗（通常也是IgG結(jié)構(gòu)）或需要檢測(cè)動(dòng)物因此產(chǎn)生的抗藥抗體時(shí)，會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的基質(zhì)干擾，通常表現(xiàn)在背景信號(hào)值增高、信號(hào)競(jìng)爭(zhēng)與屏蔽及特異性下降等三面。這些干擾直接導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度下降、定量不準(zhǔn)確、假陽(yáng)性/假陰性風(fēng)險(xiǎn)增加，嚴(yán)重威脅到藥代動(dòng)力學(xué)和免疫原性評(píng)估數(shù)據(jù)的可靠性與法規(guī)接受度。

為解決上述問(wèn)題，必須并行制備和應(yīng)用一對(duì)功能互補(bǔ)、來(lái)源一致的核心試劑，即去除IgG食蟹猴血清（IgG-depleted Cynomolgus Serum）和純化食蟹猴IgG（Purified Cynomolgus IgG）。在不同科研場(chǎng)景中，食蟹猴IgG的“存在"與“純凈"有著截然不同的需求：

對(duì)于基因治療（如AAV載體治療）、細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)，血清中殘留的IgG可能引發(fā)補(bǔ)體激活、免疫排斥等干擾反應(yīng)，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果失真，因此需要徹-底去除IgG以獲得“無(wú)IgG干擾"的血清基質(zhì)；

在抗體藥物研發(fā)、傳染病血清學(xué)診斷、免疫功能研究中，高純度的食蟹猴IgG是制備標(biāo)準(zhǔn)品、抗原、特異性抗體的核心原料，其純度直接決定后續(xù)實(shí)驗(yàn)的可靠性。

無(wú)論是“去除"還是“純化"，核心都是實(shí)現(xiàn)對(duì)食蟹猴IgG的精準(zhǔn)調(diào)控，適配不同科研場(chǎng)景的需求。

02    去除IgG食蟹猴血清的方法

去除食蟹猴血清中的內(nèi)源性IgG，是制備高靈敏度免疫檢測(cè)基質(zhì)的核心步驟。其主要目標(biāo)是最-大化去除IgG的同時(shí)，最小化對(duì)其他血清成分的影響和樣品的稀釋。

【親和層析法】

原理：利用Protein A/G與IgG Fc段的高親和力特異性結(jié)合

優(yōu)點(diǎn)：黃金標(biāo)準(zhǔn)。去除效率極-高(>99%)，特異性好，條件溫和

缺點(diǎn)：成本較高，需要色譜設(shè)備，可能需處理柱再生

適用場(chǎng)景：大規(guī)模、高質(zhì)量制備標(biāo)準(zhǔn)基質(zhì)

【免疫沉淀法】

原理：使用抗食蟹猴IgG抗體與血清孵育，形成沉淀后離心去除

優(yōu)點(diǎn)：特異性高，去除徹-底

缺點(diǎn)：成本高昂，可能引入抗體干擾，操作較繁瑣

適用場(chǎng)景：小規(guī)模、對(duì)特異性要求極-高的實(shí)驗(yàn)

【多聚物沉淀法】

原理：加入辛酸、硫酸銨等使IgG沉淀

優(yōu)點(diǎn)：成本極低，操作簡(jiǎn)單快速

缺點(diǎn)：特異性差，共沉淀其他蛋白，樣品稀釋/變性

適用場(chǎng)景：小規(guī)模、對(duì)特異性要求極-高的實(shí)驗(yàn)

【商業(yè)試劑盒法】

原理：預(yù)包裝的親和離心柱或磁珠

優(yōu)點(diǎn)：方便快捷，重復(fù)性好，無(wú)需自行摸索條件

缺點(diǎn)：?jiǎn)未纬杀咀?高，通量有限

適用場(chǎng)景：實(shí)驗(yàn)室常規(guī)小規(guī)模制備

對(duì)于絕大多數(shù)需要高靈敏度免疫分析的場(chǎng)景，基于Protein G的親和層析法是制備高質(zhì)量IgG去除食蟹猴血清（IgG-depleted Cynomolgus Serum）的首-選方法。其核心在于適度的樣品稀釋、低速上樣、流穿液重復(fù)上樣以及嚴(yán)謹(jǐn)?shù)暮筇幚砼c質(zhì)控。通過(guò)此方法獲得的基質(zhì)，能從根本上解除內(nèi)源性IgG對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的干擾，為后續(xù)獲得可靠的藥代動(dòng)力學(xué)和免疫原性數(shù)據(jù)奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

03    純化食蟹猴IgG的方法

純化食蟹猴IgG是獲取標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照抗體和關(guān)鍵試劑的核心技術(shù)。目標(biāo)是在保持其天然結(jié)構(gòu)和功能的前提下，獲得高純度、高回收率的IgG。常規(guī)方法如下：

【親和層析法】

原理：利用Protein A/G與IgG Fc段的特異性可逆結(jié)合

優(yōu)點(diǎn)：金標(biāo)準(zhǔn)。一步可達(dá) >95% 純度，條件溫和，活性好

缺點(diǎn)：成本高，可能洗脫條件較劇烈，需去除結(jié)合配體

適用場(chǎng)景：常規(guī)制備、標(biāo)準(zhǔn)品生產(chǎn)

【免疫親和層析法】

原理：利用Protein A/G與IgG Fc段的特異性可逆結(jié)合

優(yōu)點(diǎn)：特異性極-高，可區(qū)分亞型

缺點(diǎn)：成本最-高，配體可能滲漏，柱容量較低

適用場(chǎng)景：特定亞型純化、極-高純度要求

【免疫親和層析法】

原理：基于IgG與介質(zhì)在不同pH/離子強(qiáng)度下的電荷差異

優(yōu)點(diǎn)：成本低，分辨率高，條件溫和，易于放大

缺點(diǎn)：需要前期樣品處理，純度依賴優(yōu)化

適用場(chǎng)景：大規(guī)模工業(yè)純化、親和層析后的精純

【沉淀法】

原理：利用辛酸-硫酸銨順序沉淀

優(yōu)點(diǎn)：成本極低，無(wú)需特殊設(shè)備，可處理大量樣品

缺點(diǎn)：步驟繁瑣，純度較低（~80%），可能引起變性

適用場(chǎng)景：抗體粗提、作為親和層析的前處理

總之，Protein G親和層析是純化食蟹猴IgG（Purified Cynomolgus IgG）的核心與首-選方法。通過(guò)該方法獲得的高純度、高活性食蟹猴IgG，是確保免疫檢測(cè)準(zhǔn)確性、可重復(fù)性和法規(guī)依從性的基石，對(duì)藥物臨床前研究的成功至關(guān)重要。

04    IPHASE產(chǎn)品

綜上所述，IPHASE作為體外研究生物試劑引-領(lǐng)者，以親和層析法為生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)，成功生產(chǎn)了去除IgG食蟹猴血清（IgG-depleted Cynomolgus Serum）和純化食蟹猴IgG（Purified Cynomolgus IgG）兩款試劑，并分別對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制，確保IPHASE產(chǎn)品滿足不同客戶需求。

除去除IgG食蟹猴血清（IgG-depleted Cynomolgus Serum）和純化食蟹猴IgG（Purified Cynomolgus IgG）等特殊基質(zhì)外，IPHASE常規(guī)多種屬、多規(guī)格的空白血清及血漿基質(zhì)種類齊全，真正做到了為客戶提供“一站式"血液類樣本提供服務(wù)。同時(shí)，IPHASE也含有糞便、尿液、房水等多類型空白生物基質(zhì)，以供不同需求的客戶選用。

IPHASE生產(chǎn)產(chǎn)品均具有以下優(yōu)勢(shì)：

 合規(guī)性 產(chǎn)品來(lái)源均由正規(guī)渠道獲得，來(lái)源清晰。 

 安全性 生產(chǎn)產(chǎn)品來(lái)源均經(jīng)過(guò)病原檢測(cè)，保證產(chǎn)品質(zhì)量安全。

 高質(zhì)量 生產(chǎn)產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的內(nèi)部質(zhì)控，且同批次數(shù)量多，批次間差異性小。

 可定制 可根據(jù)客戶特殊需求，提供特殊種屬、特殊產(chǎn)品的定制服務(wù)。