Ⅰ相代謝穩(wěn)定性試劑盒

IPHASE  Phase I metabolic stability kit

Ⅰ相代謝穩(wěn)定性研究原理
肝藥酶CYP即細(xì)胞色素P450氧化酶（CYP450），屬于單加氧酶（momooxygenase），也稱肝微粒體混合功能氧化酶，多位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體內(nèi)壁上，參與藥物、致癌物、類固醇激素和脂肪酸等多種內(nèi)、外源性物質(zhì)代謝。肝藥酶CYP氧化還原酶（POR）是所有肝微粒體酶的唯.一電子供體，通過還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH）將電子傳遞給CYP450酶，CYP450酶得到電子后再與底物發(fā)生氧化還原反應(yīng)，從而發(fā)揮代謝活性。

肝微粒體中包含了大部分Ⅰ相酶，其中重要的是以CYP450為主要成分的微粒體混合功能氧化酶系統(tǒng)，在用肝微粒體進(jìn)行研究時，如加入相應(yīng)的輔助因子NADPH，則可重組體外代謝體系，從而通過體外溫孵法進(jìn)行Ⅰ相代謝穩(wěn)定性研究。


Ⅰ相代謝穩(wěn)定性試劑盒/肝微粒體代謝穩(wěn)定性試劑盒
北京匯智泰康醫(yī)藥技術(shù)有限公司針對藥物代謝研究的需要，以肝微粒體體外溫孵法為指導(dǎo)，開發(fā)了一款專門用于Ⅰ相代謝穩(wěn)定性研究的一相代謝穩(wěn)定性試劑盒/肝微粒體代謝穩(wěn)定性試劑盒，該產(chǎn)品可直接用于藥物的Ⅰ相代謝穩(wěn)定性研究，省去了肝微粒體制備和試劑配制的繁瑣過程，大大縮短了實驗周期，且試劑盒各組成成分經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測，符合Ⅰ相代謝穩(wěn)定性研究試驗要求，實驗結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性好。

本產(chǎn)品提供了藥物Ⅰ相代謝研究用到的肝微粒體、NADPH再生系統(tǒng)及其它組分，可直接用于藥物Ⅰ相代謝穩(wěn)定性的研究。本產(chǎn)品可提供肝微粒體有：人肝微粒體、恒河猴肝微粒體、比格犬肝微粒體、大鼠肝微粒體和小鼠肝微粒體，可根據(jù)實際需求，選擇不同種屬的肝微粒體。


【試驗原理】
肝微粒體中包含了大部分Ⅰ相酶，其中重要的是以CYP450為主要成分的微粒體混合功能氧化酶系統(tǒng)，在用肝微粒體進(jìn)行研究時，如加入相應(yīng)的輔助因子NADPH，則可重組體外代謝體系，從而通過體外溫孵法進(jìn)行Ⅰ相代謝穩(wěn)定性研究。
【產(chǎn)品說明】
本產(chǎn)品提供了藥物Ⅰ相代謝研究用到的所有試劑，可直接用于藥物Ⅰ相代謝穩(wěn)定性的研究，省去了試劑配制的繁瑣過程，且試劑盒各組成成分經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測，實驗結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性好。
根據(jù)微粒體種屬的不同，可根據(jù)實際需求選擇人肝微粒體、恒河猴肝微粒體、比格犬肝微粒體、大鼠肝微粒體和小鼠肝微粒體中的其中一種。
【產(chǎn)品組成】
50反應(yīng)/盒，200μL/反應(yīng)。

【產(chǎn)品使用說明】
本產(chǎn)品需于-70℃冰箱冷凍保存，切記避免反復(fù)凍融。試驗具體操作如下：
1、試驗組：
1）冰浴融化試劑盒各組分，置于冰上待用；
2）除微粒體外，將孵育體系其它各組分按照配比混合并吹吸混勻，于37℃預(yù)孵育5min；
例：200μL孵育體系配制：

注：a.體系中有機(jī)溶劑加入量不得大于1%。
    b.若實際需要n個孵育體系，則需配置n＋1個體系。
3）將以上混合液195μL/管分裝至1.5mL離心管中，于37℃水浴中保溫， 5μL/反應(yīng)加入肝微粒體，吹吸3次混勻于37℃水浴條件下啟動代謝反應(yīng)，使用秒表計時；
4）于設(shè)定孵育時間點(diǎn)，向孵育體系中加入200μL預(yù)冷的意境終止反應(yīng)（預(yù)冷意境：孵育體系體積=1:1）。
2、對照組：
1）陽性對照組：將受試物換為陽性底物；
2）陰性對照組：不加A液、B液； 
3）空白對照組：只包含底物和PBS緩沖液。
【運(yùn)輸條件】
    干冰運(yùn)輸。
【注意事項】
1.試驗開始前，請自行準(zhǔn)備1.5mL離心管、不同規(guī)格槍頭、37℃水浴鍋等。
2.本產(chǎn)品僅供科研使用，不能用于人體及動物的治療或臨床診斷。
3.使用前，需于冰浴條件下解凍并混合均勻。
4.于-70℃冰箱冷凍保存，切勿反復(fù)凍融。
5.在使用過程中，也可根據(jù)實際實驗需求調(diào)整各組分的加入量。

匯智泰康是一家位于中美兩地的生物醫(yī)藥合同研發(fā)機(jī)構(gòu)，整合中美兩地的藥物研發(fā)技術(shù)服務(wù)平臺，基于AAALAC、GLP、ISO/IEC 17025實驗室認(rèn)證，面向企業(yè)及研發(fā)機(jī)構(gòu)提供分析化學(xué)、DMPK、藥理藥效、生物學(xué)、以及毒理安全性評價產(chǎn)品與服務(wù)。

體外代謝其他產(chǎn)品：
Ⅰ相代謝穩(wěn)定性試劑盒/肝微粒體代謝穩(wěn)定性（一相代謝）試劑盒
II相代謝穩(wěn)定性試劑盒/肝微粒體代謝穩(wěn)定性（二相代謝）試劑盒
CYP450酶代謝表型研究試劑盒（化學(xué)抑制法/7種抑制劑）
CYP450酶代謝表型研究試劑盒（重組酶法/7種酶）
酶抑制（IC50）研究試劑盒（7種特異性底物）
肝微粒體（人，猴，犬，大鼠，小鼠）
肝S9（人，猴，犬，大鼠，小鼠）
肝原代細(xì)胞（人，猴，犬，大鼠，小鼠）
CYP450酶/細(xì)胞色素P450酶
NADPH再生系統(tǒng)
UGT孵育系統(tǒng)
PBS緩沖液
陽性底物